樣品處理:**先,樣品需要進(jìn)行前處理。這可能包括樣品提取、純化和稀釋等步驟。全自動(dòng)PCR分析系統(tǒng)通常配備了樣品處理模塊,可以自動(dòng)完成這些步驟。用戶將樣品放入系統(tǒng)中,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置相關(guān)參數(shù),系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)完成樣品的裝載、混合和處理。PCR反應(yīng):在樣品處理完成后,進(jìn)入PCR反應(yīng)階段。系統(tǒng)內(nèi)置了熱循環(huán)儀,能夠按照預(yù)設(shè)的PCR程序進(jìn)行溫度變化和時(shí)間控制。在每個(gè)PCR周期中,系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)調(diào)節(jié)溫度來實(shí)現(xiàn)DNA的變性、引物結(jié)合和延伸等步驟,從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)序列的擴(kuò)增。這個(gè)過程通常涉及到多個(gè)溫度區(qū)間和多個(gè)周期。實(shí)時(shí)熒光檢測(cè):全自動(dòng)PCR分析系統(tǒng)通常配備了實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)技術(shù)。在PCR反應(yīng)過程中,系統(tǒng)會(huì)定期采集PCR管或孔板中的熒光信號(hào)。它通常包括激發(fā)光源、熒光探測(cè)器和相應(yīng)的濾光片。熒光染料與擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合后會(huì)發(fā)出熒光信號(hào),系統(tǒng)通過熒光探測(cè)器將熒光信號(hào)轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)進(jìn)行記錄。數(shù)據(jù)采集與分析:實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)會(huì)被系統(tǒng)內(nèi)置的數(shù)據(jù)采集與分析模塊處理。它可以根據(jù)預(yù)設(shè)的閾值和曲線分析算法,自動(dòng)計(jì)算擴(kuò)增曲線、閾值周期、CT值等PCR分析相關(guān)參數(shù)。這個(gè)模塊通常具有數(shù)據(jù)存儲(chǔ)功能,并能生成結(jié)果報(bào)告。控制與操作:全自動(dòng)PCR分析系統(tǒng)配備了控制與操作系統(tǒng),用于設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)、監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)和處理數(shù)據(jù)。用戶可以通過觸摸屏或計(jì)算機(jī)界面進(jìn)行操作,設(shè)置PCR程序、樣品信息和分析參數(shù)等。
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