基本結構

組成

流式細胞儀主要由四部分組成。它們是：流動室和液流系統(tǒng)；激光源和光學系統(tǒng)；光電管和檢測系統(tǒng)；計算機和分析系統(tǒng)。上圖為其結構示意圖。

流動室和液流系統(tǒng)

流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成，常用光學玻璃、石英等透明、穩(wěn)定的材料制作。設計和制作均很精細，是液流系統(tǒng)的心臟。樣品管貯放樣品，單個細胞懸液在液流壓力作用下從樣品管射出；鞘液由鞘液管從四周流向噴孔，包圍在樣品外周后從噴嘴射出。為了保證液流是穩(wěn)液，一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用，被檢測細胞被限制在液流的軸線上。流動室上裝有壓電晶體，受到振蕩信號可發(fā)生振動。

激光源和光學系統(tǒng)

經(jīng)特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發(fā)才能發(fā)出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光；激光器又以氬離子激光器為普遍，也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據(jù)被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)光譜而定。汞燈是**常用的弧光燈，其發(fā)射光譜大部分集中于300～400nm，很適合需要用紫外光激發(fā)的場合。氬離子激光器的發(fā)射光譜中，綠光514nm和藍光488nm的譜線**強，約占總光強的80%；氪離子激光器光譜多集中在可見光部分，以647nm較強。免疫學上使用的一些熒光染料激發(fā)光波長在550nm以上，可使用染料激光器。將有機染料做為激光器泵浦的一種成份，可使原激光器的光譜發(fā)生改變以適應需要即構成染料激光器。例如用氬離子激光器的綠光泵浦含有Rhodamine6G水溶液的染料激光器,則可得到550～650nm連續(xù)可調(diào)的激光，尤在590nm處轉換效率**高，約可占到一半。為使細胞得到均勻照射，并提高分辨率，照射到細胞上的激光光斑直徑應和細胞直徑相近。因此需將激光光束經(jīng)透鏡會聚。光斑直徑d可由下式確定：d=4λf/πD。λ為激光波長；f為透鏡焦距；D為激光束直徑。色散棱鏡用來選擇激光的波長，調(diào)整反射鏡的角度使調(diào)諧到所需要的波長λ。為了進一步使檢測的發(fā)射熒光更強，并提高熒光訊號的信噪比，在光路中還使用了多種濾片。帶阻或帶通濾片是有選擇性地使某一濾長區(qū)段的光線濾除或通過。例如使用525nm帶通濾片只允許FITC（Fluoresceinisothiocyanate,異硫氰熒光素）發(fā)射的525nm綠光通過。長波通過二向色性反射鏡只允許某一波長以上的光線通過而將此波長以下的另一特定波長的光線反射。在免疫分析中常要同時探測兩種以上的波長的熒光信號，就采用二向色性反射鏡，或二向色性分光器，來有效地將各種熒光分開。

光電管和檢測系統(tǒng)

經(jīng)熒光染色的細胞受合適的光激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光是通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量的。光電倍增管（PMT）**為常用。PMT的響應時間短，僅為ns數(shù)量級；光譜響應特性好，在200～900nm的光譜區(qū)，光量子產(chǎn)額都比較高。光電倍增管的增益從10到10可連續(xù)調(diào)節(jié)，因此對弱光測量**有利。光電管運行時特別要注意穩(wěn)定性問題，工作電壓要**穩(wěn)定，工作電流及功率不能太大。一般功耗低于0.5W；**大陽極電流在幾個毫安。此外要注意對光電管進行暗適應處理，并注意良好的磁屏蔽。在使用中還要注意安裝位置不同的PMT，因為光譜響應特性不同，不宜互換。也有用硅光電二極管的，它在強光下穩(wěn)定性比PMT好。

從PMT輸出的電信號仍然較弱，需要經(jīng)過放大后才能輸入分析儀器。流式細胞計中一般備有兩類放大器。一類是輸出信號輻度與輸入信號成線性關系，稱為線性放大器。線性放大器適用于在較小范圍內(nèi)變化的信號以及代表生物學線性過程的信號，例DNA測量等。另一類是對數(shù)放大器，輸出信號和輸入信號之間成常用對數(shù)關系。在免疫學測量中常使用對數(shù)放大器。因為在免疫分析時常要同時顯示陰性、陽性和強陽性三個亞群，它們的熒光強度相差1～2個數(shù)量級；而且在多色免疫熒光測量中，用對數(shù)放大器采集數(shù)據(jù)易于解釋。此外還有調(diào)節(jié)便利、細胞群體分布形狀不易受外界工作條件影響等優(yōu)點。

計算機和分析系統(tǒng)

經(jīng)放大后的電信號被送往計算機分析器。多道的道數(shù)是和電信號的脈沖高度相對應的，也是和光信號的強弱相關的。對應道數(shù)年縱坐標通常代表發(fā)出該信號的細胞相對數(shù)目。多道分析器出來的信號再經(jīng)模-數(shù)轉換器輸往微機處理器編成數(shù)據(jù)文件，或存貯于計算機的硬盤和軟盤上，或存于儀器內(nèi)以備調(diào)用。計算機的存貯容量較大，可存貯同一細胞的6～8個參數(shù)。存貯于計算機內(nèi)的數(shù)據(jù)可以在實測后脫機重現(xiàn)，進行數(shù)據(jù)處理和分析，**后給出結果。除上述四個主要部分外，還備有電源及壓縮氣體等附加裝置。

其原理是在一組混合的細胞群中，加入特異的針對特定靶細胞表面分子的熒光標記單克隆抗體，這種特異單克隆抗體與其對應的抗原靶分子結合，結合后的熒光標記抗體停留在特定細胞的表面，稱為熒光抗體標記的靶細胞；將含有被標記細胞的混合細胞群混懸在一定容積的上樣緩沖液中，再通過FACS的進樣吸管孔，儀器就會將細胞懸液制成以單細胞排列的微細流束。

當每一個細胞通過儀器的激光束照射時，帶在細胞上的熒光就會被相應的激光束**并發(fā)出對應的熒光，通過敏感的光電倍增管即可檢測到從細胞表面發(fā)出的熒光。根據(jù)測得的散射光（scatteredlight）可得到細胞大小及顆粒狀態(tài)的信息；而從熒光的發(fā)射強度（fluorescenceemissions）則提供了結合在細胞上的抗體信息，進而也被反映了該細胞表面相應分子的表達情況。

在流式細胞儀分離裝置中，返回到計算機的信號，可用來產(chǎn)生一種電荷，這種電荷以特定準確的時間通過FACS的吸管孔，在與吸管孔的液體流相相遇時，可將液體流打碎成只含一個細胞的微滴。含有電荷的微滴就會從主液體流中偏移，穿過一雙極板。帶正電荷的微滴被吸引**陰極，而帶負電荷的被吸引**陽極。以這種方式，特定的細胞亞群由于標記著不同的熒光抗體而帶有不同的電荷，從而將目的細胞從混合的細胞群中分揀出來。

1.免疫細胞群的分類靜止淋巴細胞之間從其外觀形態(tài)難以區(qū)分，都是以致密的核及少量細胞質(zhì)組成的小而圓的細胞為特征。然而，這些細胞確是由功能各異的不同細胞亞群所組成，各種細胞群表達各自特殊的表面分子。例如，B淋巴細胞上表達有特異的膜表面免疫球蛋白（mIg），而成熟的T淋巴細胞表面表達特異的CD3分子。T淋巴細胞又可進一步按其表達的不同表面標志細分成不同的亞群，如CD4+CD8-和CD4-CD8+亞群。因此，可由這些特征性的表面標志，將細胞分為不同的群或亞群。

2.免疫細胞的分化發(fā)育免疫細胞分化發(fā)育的不同階段，其表面標志也在不斷地發(fā)生著變化。如胸腺細胞（發(fā)育過程中的T淋巴細胞），在發(fā)育的不同階段從不成熟到成熟，其表面標志經(jīng)歷了從雙陰性（CD4-CD8-）到雙陽性（CD4-CD8-），直到單陽性（CD4+CD8-或CD4-CD8+）的過程。正常生理狀態(tài)下，發(fā)育不同階段的胸腺細胞以一定的比例存在于胸腺中。通過檢測這些標志，即可判定某些因素（基因突變等）對胸腺細胞發(fā)育的影響。

3.免疫細胞的分子表達免疫細胞的不同因素的影響下，其表達的分子也會發(fā)生變化。通過檢測這些分子的變化，可分析細胞功能以及細胞分化狀態(tài)等。例如，靜止的T淋巴細胞不表達或低水平表達CD69分子；而一經(jīng)活化，其表達CD69分子數(shù)量明顯增加。因此，可通過檢測這些活化標志的變化來判定細胞狀態(tài)以及研究影響細胞活化狀態(tài)的因素。

4.免疫細胞的分離如前所述，免疫細胞是一組極不均一的群體。所以在研究免疫細胞功能時，常常需要把某些特異的細胞分離和純化。雖然免疫細胞分離的方法很多，但用FACS來純化特定的細胞群是目前**為有效和方便的手段。例如，**近頗受關注的CD4+CD25+T淋巴細胞是一群具有免疫調(diào)節(jié)（免疫抑制）功能的細胞群。在對其特點及功能進行研究時，**要的問題是分離該細胞群。用相應的單克隆抗體與其結合，再用FACS進行分離，就能得到純度很高CD4+CD25+T淋巴細胞細胞群。而其他分離方法不僅分離過程煩瑣，也很難控制無菌條件及保證細胞純度。

美國貝克曼庫爾特有限公司開發(fā)和銷售儀器，生化，軟件以及能夠簡化和自動化實驗室處理的產(chǎn)品。我們的產(chǎn)品能夠支持在與疾病戰(zhàn)斗的各個階段的生物醫(yī)學分析－從前沿醫(yī)學研究到患者血液檢測。在2010年，公司銷售額為$37億，其中87.6％的銷售額來自**診斷市場，12.4％來自生物醫(yī)學研究市場。

貝克曼庫爾特提供了一個廣泛的分離，檢測和分析生命組成部分的儀器業(yè)務。在醫(yī)院**實驗室中，我們可以提供實際意義上的各種常規(guī)血液檢測以及75％的其它檢測。我們的70％以上的產(chǎn)品都保持在市場高端位置上：血液學，常規(guī)生化系統(tǒng)，離心，毛細管電泳，蛋白質(zhì)分析，生物機器人以及快速檢測。

貝克曼庫爾特Gallios流式細胞儀產(chǎn)品介紹：

主要特點

●高精尖的全自動的10色分析提高了科研的精度

●全新一代高速、高分辨率、高精度數(shù)字數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)

●樣品制備實現(xiàn)了自動化、進而**大限度地加快了研究速度

●真正支持當前流式發(fā)展趨勢（多參數(shù)、小顆粒檢測、弱熒光表達、稀有細胞、自動化高通量上樣）

貝克曼庫爾特MoFlo XDP超速流式細胞分選系統(tǒng)產(chǎn)品介紹：

儀器特點

●MoFlo XDP電子的死時間縮短到零，檢測速度快，靈敏度高。其分析速度＞100，000細胞/秒，分選速度＞70，000細胞/秒(在任何數(shù)量熒光和補償下)。如果用多激光配置，它對每個細胞都能獲得和分析18個熒光參數(shù)和2個散射光參數(shù)。

●四通道分選，能同時分選4種不同的細胞亞群

●噴嘴種類有8種，50μm-200μm

儀器適用范圍：

●**佳檢測和分選細胞大小范圍：0.5-50um

●細胞種類：真核細胞（組織分離細胞、細胞系、血液、骨髓、體液細胞等）

●可應用的熒光素標記物：FITC/PE/PE-TexasRed/PE-Cy5/PE-Cy7/APC/APCCy5.5/APC-Cy7/DAPI/QDot625及符合上述激發(fā)光及發(fā)射光檢測濾片的熒光素

儀器主要應用：

●基于細胞表型的分析分選

●基于細胞漿或細胞核（胞內(nèi)）蛋白的分析分選

●基于DNA倍體的細胞周期分析分選

●基于代謝（如SidePopulation，SP）細胞的分選

●有標記物的幾乎任何細胞的分析分選都可以進行

貝克曼庫爾特EPICS XL/XL-MCL流式細胞儀（四色）產(chǎn)品介紹：

主要特點

●EPICS XL系統(tǒng)為封閉系統(tǒng)，能防止生物危害。

●EPICS XL系統(tǒng)具備**新技術成果（state-of-the-art）的數(shù)碼信息處理功能，可保證可靠的線性和無漂移的信息放大及顏色補償作用，從而使該系統(tǒng)得以選擇可靠的熒光強度和進行多位點研究。

●在顏色補償計算過程中采用了完整的四路補償矩陣。

●對樣品檢測量大的用戶，XL-MCL系統(tǒng)提供非常便利的多管樣品旋轉進樣盤，每小時可檢測100份樣品。

●XL-MCL系統(tǒng)能使待檢樣品被抽吸前即已達到標準的充分混勻，并可通過條形碼識別三通道陽性樣品。

●XL及XL-MCL兩型流式細胞儀共同使用的標準SystemⅡTM軟件可使四色檢驗的標準化和顏色補償全部自動化。

●用戶可根據(jù)不同的研究要求使用可更換的濾色片，使該儀器得到廣泛的研究應用。

XL系統(tǒng)的研究應用領域

四色免疫熒光多參數(shù)DNA分析血小板研究、

細胞生物學及功能的研究

貝克曼庫爾特Cytomics FC 500流式細胞儀（五色）產(chǎn)品介紹：

主要特點

●為研究性實驗室設計了精密的、**的操作程序

●采用單激光或雙激光激發(fā)方式，可進行5色分析

●配備共線性（collinear）第二激光，以便對抗體和熒光色素的選擇具有

更大的靈活性，排除延時計算的需要和伴隨的空間-分離光束干擾

●CXP軟件可進行自動的數(shù)據(jù)獲取和應用設置

●自動化調(diào)控裝置

●多種進樣方式（CL進樣、MCL手動、MCL自動、單管手動進樣，PL進樣，可使用24孔、48孔、96孔板及EP管，同時可使用12X75

試管）

●簡明的補償設置及其調(diào)節(jié)

應用范圍

5色樹狀細胞分析、5色鈣離子流動分析、可溶性細胞因子檢測、5色白血病/淋巴瘤細胞分析、GFP應用、血小板GPIIb/IIIa受體定量分析

EPICS XL/XL-MCL流式細胞分析系統(tǒng)產(chǎn)品介紹：

**臺單激光發(fā)四色熒光的流式細胞儀

保證所有信號來源同一細胞

**臺數(shù)字化的流式細胞儀

采用數(shù)字信號進行對數(shù)轉換，使信號保持極高的線性度和重復性

**臺采用光纖通訊的流式細胞儀

避免信號傳輸中的失真

**臺利用軟件進行ADS（優(yōu)化數(shù)字補償）方式的流式細胞儀

去除所有熒光染料發(fā)射光譜之間的干擾，保證結果的準確性

**臺可互換式光學濾片設計的分析型流式細胞儀

可互換式光學濾片，無需進行光路調(diào)整，保證新染料的應用

**臺具有全程質(zhì)控的流式細胞儀

除常規(guī)質(zhì)控品外，尚有全自動質(zhì)控程序，繪制質(zhì)控圖，出控報警，質(zhì)控參考值設定，質(zhì)控結果比較

**臺利用生物樣本進行補償?shù)牧魇郊毎麅x

具有補償向導，指導用戶利用生物樣本進行顏色補償

EXPO 32 ADC數(shù)據(jù)采集與分析軟件（Windows界面）

Windows環(huán)境下EXPO32 ADC軟件，在當今信息產(chǎn)業(yè)時代為現(xiàn)有的XL用戶提供了更為精確的顏色補償方式。ADC意為Advanced Digital Compensation（優(yōu)化的數(shù)字補償法）。采用反轉矩陣補償，它與單激光4色分析結合，為客戶提供**佳的分析方法，為患者提供更準確的結果。有其更靈活的特點，可讀取任意廠商的FCS格式的存儲文件。與OF-FICF應用軟件完全兼容。

管理界面，多重用戶目錄，并可利用密碼加以保護

利用鼠標直接拖曳已存儲的方案及Listmode，Histogram文件

將統(tǒng)計結果直接輸出**EXCEL文件

將圖形直接拖曳**Word及Powerpoint文檔

無限制的直方圖加，并可顯示統(tǒng)計結果

二維及三維分析

4種不同的點圖分辨率64*64 128*1228 256*256 512*512

快速補償及補償向導

PRISM濃縮柱形圖，將4色分析的16個結果同時顯示

多重文件分析，F(xiàn)low PAGE工作報告

Flow Center工作站

lntel pentium lll cpu

256mb ram

30G硬盤

40*ide cd-rom

G450顯卡

可連接雙顯示器

多種規(guī)格顯示器選擇

PCI 10/100以太網(wǎng)卡

其它軟件

System 11軟件

TetraOne全自動四色分析軟件

ReticOne全自動網(wǎng)織紅細胞分析軟件

StemOne全自動造血干細胞分析軟件

Multicycle for windows dna分析軟件

多種型號的標本制備儀選擇

Q-prep免疫標本制備儀

DNA-prep：DNA分析標本制備儀

TQ-prep:32管樣本制備儀

Prep-Plus11：完成全自動加樣過程

FC 500流式細胞分析系統(tǒng)產(chǎn)品介紹：

保留XL的先進設計特點

光纖通訊、數(shù)字化信號傳遞、優(yōu)化的全矩陣顏色補償，可互換式光學濾片，更換濾片后無需調(diào)校光路

全新技術

20比特100萬道數(shù)據(jù)分析

光電倍增管PMTs（光譜監(jiān)測范圍185-900nm）對紅光檢測更敏感

全新光路設計，**大限度減少光損失

單激光激發(fā)5色熒光

雙激光（可選擇第二根激光）激發(fā)5色熒光，可選擇更多的染料

可選擇96孔板進樣方式（MPL），也可進行24孔板進樣，EP管進樣及普通試管進樣

3種模式的進樣選擇

FS收集角度的選擇：1°-8°or1°-19°

軟件特點

工作站-Pentium IV CPU，1.7GHz:Windows 2000界面

CXP/MXP數(shù)據(jù)采集及分析軟件

-以FCS3.0格式存儲的Listmode文件

-利用軟件運行顏色補償

-ListCOMP：可在Listmode文件重新調(diào)整顏色補償

-AutoSetup:向導

-QuickSET:快速調(diào)整顏色補償

-AutoGATE

-“point and click”設門方式

-陽性分析

Flowpage2

可利用拖曳方式將圖形移到OFFICE文件

輸出**PDF文件

品牌：達安

中山大學達安基因股份有限公司，是以分子診斷技術為主導的，集**檢驗試劑和儀器的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售以及**連鎖醫(yī)學獨立實驗室**檢驗服務為一體的生物醫(yī)藥高科技企業(yè)。

流式細胞儀influx產(chǎn)品介紹:

發(fā)射光路和散射光路系統(tǒng)：

熒光發(fā)射光通過一個20倍、0.6NA(數(shù)值孔徑)的顯微物鏡收集，光線聚焦于7個空間獨立的鏡面針孔。

模塊化的檢測器可由用戶自由配置。

同時對液流、針孔和激光照射點成像觀察，方便快速直觀的調(diào)節(jié)。

常規(guī)前向角散射光由75和50mm的光圈可調(diào)鏡頭、PMT進行收集檢測，檢測空間分辨率0.5um。收集角度：2-17°可調(diào)。

微小顆粒(前向角)檢測器(SPO)由一個20倍，0.42NA(數(shù)值孔徑)顯微物鏡、鏡面針孔和針孔檢測器組成。SPO前向角散射檢測空間分辨率&gt;0.2um。收集角度：2-30°可調(diào)。

側向角散射光使用一個90度收集物鏡和PMT檢測，空間分辨率&gt;0.2um。

熒光檢測靈敏度：FITC&lt;125 MESF

PE&lt;125 MESF

熒光檢測分辨率：全峰寬CV&lt;3.0％

熒光線性：Doublet/singlet ratio:1.95–2.05

流式細胞儀AccuriC6產(chǎn)品介紹:

**先C6流式細胞儀能避免操作新手的一個容易犯的錯誤——調(diào)整電壓，同步化不同的細胞。C6流式細胞儀采用的是專利低壓流動系統(tǒng)(蠕動泵)而不是真空泵，因此可以精確控制樣本進樣速度和活性區(qū)流的直徑，這就能為樣本選擇**佳的活性流區(qū)的大小。

C6的探測器不但可靈敏的捕獲前散射光和旁散射光，還有四個可調(diào)光學濾光片的熒光探測器。可以實時收集1600萬個通道的數(shù)據(jù)，寬的動態(tài)范圍**了對探測器進行補償?shù)?*要性，當使用Cflow軟件的Zoom function模式觀察一個特定通道時，其他數(shù)據(jù)仍然被監(jiān)測并且記錄到數(shù)據(jù)文件。

安裝和維護簡單。系統(tǒng)擁有自動除污和清洗流路程序。當關閉主機時，自動化系統(tǒng)會自動用清洗液清洗流路系統(tǒng)，然后再使之充滿鞘液。鞘液會保持在流路系統(tǒng)中，直到下次開機。在使用過程中，如果需要啟動清洗流程，那么點擊一下鼠標就可。

由于C6流式細胞儀不使用加壓流動系統(tǒng)，可容納多種類型的管子，包括任何品牌的12×75mm管和**微型的離心管(無蓋)。

C6流式細胞儀系統(tǒng)設計小巧靈便(17.3寸寬x16.3寸深)，可在任何實驗室配備。重量不到30磅，可方便移動，這是其他同種產(chǎn)品所不能達到的。

C6對電源電源(110V-240V、50-60HZ)沒有特殊要求，不需要增加任何電源控制設備。

如果樣品比較多，可選配自動進樣裝置。

Cflow操作分析系統(tǒng)，能簡單快速的搜集分析數(shù)據(jù)，具有優(yōu)良人機界面，研究人員經(jīng)過半個小時的培訓，就可以靈活、準確的使用C6流式細胞儀系統(tǒng)。

品牌：邁瑞

邁瑞是全球**的醫(yī)療設備和解決方案供應商、美國紐交所上市企業(yè)，主要業(yè)務集中在生命信息與支持、體外診斷、數(shù)字超聲、醫(yī)學影像四大領域。邁瑞以“普及高端科技，讓更多人分享優(yōu)質(zhì)生命關懷”為使命，致力于成為守護人類健康的核心力量。

邁瑞成立于1991年，總部設在中國深圳。位于美國西雅圖、新澤西、邁阿密、瑞典斯德哥爾摩、中國深圳、北京、南京、成都、西安、上海的十大研發(fā)中心，把全球各種**需求和先進技術融入持續(xù)的創(chuàng)新，幫助**各地的人們改善醫(yī)療條件、降低醫(yī)療成本。

邁瑞在北美、歐洲、亞洲、非洲、拉美等地區(qū)的22個**設有子公司，在中國設有32家分公司，員工近8000名，在全球形成龐大的研發(fā)、營銷和服務網(wǎng)絡。目前，邁瑞的產(chǎn)品和解決方案已應用于全球190多個**，中國十萬多家醫(yī)療機構、95%以上的三甲醫(yī)院。

流式檢測輔助試劑產(chǎn)品介紹：

105-004580-00流式細胞儀用溶血劑1*50ml

105-005386-00流式細胞儀用鞘液2*5L

105-004582-00流式細胞儀用清洗液1*50ml

105-004485-00流式多色質(zhì)控微球1*2ml

HLA-B27試劑產(chǎn)品介紹：

HLA-B27檢測雙色試劑由HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE雙色試劑（流式細胞法）和IgG2a-FITC/IgG1-PE雙色同型對照（流式細胞法）組成，后者使用與前者相應單克隆抗體亞型一致的免疫球蛋白，和樣本反應時，與前者有著相同的非特異性結合水平，但是與相應抗原無特異性的反應。作為對照試劑，可以排除前者試劑中單克隆抗體與樣本的非特異性反應，從而提高檢測的準確度。

人外周血細胞與該雙色試劑避光孵育反應，熒光素偶聯(lián)抗體與白細胞表面特異性抗原結合。采用溶血/洗滌的方式處理反應樣本，**后將處理后的樣本在流式細胞儀上進行檢測。由于不同細胞抗原表達量不同，其結合的熒光素偶聯(lián)抗體的數(shù)量會有差異，該樣本液通過流動室時在激光照射下會被激發(fā)出不同發(fā)射波長的熒光，流式細胞儀對細胞的前向角散射光（FSC）、側向角散射光（SSC）和熒光信號進行收集，根據(jù)樣本細胞檢測的前向角散射光、側向角散射光和熒光強度等參數(shù)信息，對HLA-B27陰陽性結果進行判定。此外，該試劑采用HLA-B27/HLA-B7雙抗體策略，可以有效降低HLA-B7抗原帶來HLA-B27檢測假陽性的干擾，進一步提高檢測結果的準確性。

TBNK試劑產(chǎn)品介紹：

TBNK淋巴亞群全套分析由CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC四色試劑（流式細胞法）和CD3-FITC/CD16+56-PE/CD45-PerCP/CD19-APC四色試劑（流式細胞法）兩個四色試劑組成。人外周血樣本與該四色試劑避光孵育反應，熒光素偶聯(lián)抗體與白細胞表面特異性抗原結合，采用溶血/免洗的方式處理反應樣本，**后將處理后的樣本在流式細胞儀上進行檢測。由于不同類型細胞結合不同種類和數(shù)量的熒光素，該樣本液通過流動室時在激光照射下會被激發(fā)出不同發(fā)射波長的熒光，流式細胞儀對細胞的前向角散射光（FSC）、側向角散射光（SSC）和熒光信號進行收集，根據(jù)樣本細胞檢測的前向角散射光、側向角散射光和熒光強度等參數(shù)信息，對淋巴細胞中T淋巴細胞（CD3+）亞群、輔助/誘導T淋巴細胞（CD3+CD4+）亞群和抑制/細胞毒T淋巴細胞（CD3+CD8+）亞群、B淋巴細胞（CD3-CD19+）和NK細胞（CD3-(CD16+CD56+)）進行分類，還可以提供CD4/CD8比率。

BriCyte E6產(chǎn)品介紹：

BriCyte?E6自動進樣機型：樣本架一次性可容納40管樣本，提升大批量標本檢測的自動化程度。并且具備自動混勻功能，確保優(yōu)異的檢測準確性和重復性。BriCyteE6隨機標配2個樣本架，用戶可交替裝載樣本，簡化操作，節(jié)約時間。

BriCyte?E6手動進樣機型：1.5ml和2ml的微量離心管可直接上機檢測，降低樣本轉換容器時丟失細胞和發(fā)生生物污染的幾率。

流式細胞儀在使用前，甚**在使用過程中都要精心進行調(diào)試，以保證工作的可靠性和**佳性。調(diào)試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。

激光強度：除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為**大。

液流速度：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督，調(diào)節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。

測量區(qū)光路調(diào)節(jié)：這是調(diào)試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。

流式細胞術中所測得的量是相對值，因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得**的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調(diào)整和定量標度。標準樣品應該穩(wěn)定，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品，雞血紅細胞做為生物學標準樣品。微球用樹脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血（抗凝劑：雞血=1：4），經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，**后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。

儀器的操作和使用

①打開電源，對系統(tǒng)進行預熱；

②打開氣體閾，調(diào)節(jié)壓力，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統(tǒng)；

③在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng)；

④利用校準標準樣品，調(diào)整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎上，0和90散射的熒光強度**強，并要求變異系數(shù)為**??；

⑤選定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品；同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程；

⑥樣品測量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng)；

⑦因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤（有的機器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大），因此可關閉氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理；

⑧將所需結果打印出來。

操作和使用中的注意事項

1）光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件，暴露的較強的光線下以后，需要較長時間的“暗適應”以**或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽；

2）光源不得在短時間內(nèi)（一般要1h左右）關上又打開；使用光源**須預熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常；

3）液流系統(tǒng)**需隨時保持液流暢通，避免氣泡栓塞，所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、**；

4）注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等；

5）特別強調(diào)每次測量都需要對照組。